一、腎小球腎炎模型背景簡(jiǎn)介
采用本方法制備的大鼠同種免疫性抗腎小球基膜腎炎,其致病機(jī)制是基于當(dāng)動(dòng)物受到自體抗腎抗體或自體抗原抗體復(fù)合物刺激后,可引起機(jī)體腎小球基膜產(chǎn)生免疫反應(yīng),造成腎臟組織內(nèi)腎小球基膜出現(xiàn)免疫損傷,最終形成腎炎。
二、腎小球腎炎模型簡(jiǎn)介
模型制作過(guò)程中由于大鼠是主動(dòng)免疫,主動(dòng)地產(chǎn)生抗腎組織抗體,故又可將此類腎炎稱之為主動(dòng)型海曼(Heymann)腎炎(active Heymann nephritis, AHN)。目前已報(bào)道的主動(dòng)型海曼腎炎模型較多,且都具有模型病變穩(wěn)定,造模周期短,具有廣泛的實(shí)用性等特點(diǎn)。但在造模用的同種動(dòng)物抗原物質(zhì)制備,抗原注射劑量、注射時(shí)間及次數(shù)則略有差異。
三、腎小球腎炎模型構(gòu)建方法
3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
SD大鼠,8周齡
3.2實(shí)驗(yàn)材料
縫合線
3.3模型構(gòu)建流程
體重180~200g SD大鼠,造模前先測(cè)定其24h尿蛋白總量,并采血測(cè)血清Cr、BUN濃度。經(jīng)大鼠腹腔注射預(yù)先制備的同種大鼠腎皮質(zhì)加弗氏完全佐劑乳液(體重為150~180g SD大鼠,按30mg/kg劑量經(jīng)腹腔注射戊ba比妥鈉麻醉,常規(guī)消毒腹部皮膚并去毛,沿腹中線作正中切口,無(wú)菌手術(shù)操作進(jìn)腹,暴露腎臟,用絲線結(jié)扎腎動(dòng)脈,自結(jié)扎處向腎臟插管,剪斷腎靜脈,經(jīng)插管用生理鹽水反復(fù)沖洗腎臟至白色,切除腎臟,取腎皮質(zhì)用電動(dòng)勻漿器在冰浴中磨成勻漿,分裝后密封于-10℃冷凍保存。每次臨用時(shí)取皮質(zhì)勻漿25g,加弗氏完全佐劑至50ml,吸乳缽中研勻,緩緩加入生理鹽水100ml邊加邊研磨,使乳化完全均勻),每次2ml/只,每周注射1次(造模14周共注射7次),于造模8周開始每?jī)芍芡ㄊ占蛞?,進(jìn)行24h尿蛋白定量,并稱體重以調(diào)整注射腎皮質(zhì)的量。造模14周時(shí)除收集模型動(dòng)物尿液測(cè)24h尿蛋白量外,采血作血清Cr、BUN、ALB、 Hb與T-CHO測(cè)定。取腎臟組織作透射電鏡標(biāo)本,電鏡下觀察。
三、模型驗(yàn)證
取腎臟組織作透射電鏡標(biāo)本,電鏡下觀察