1. 收集臨床病人的卵泡液;
2. 用40um的細胞篩過濾卵泡液;
3. 1000rpm/10min,室溫離心,棄上清;
4. 1ml PBS重懸;
5. 將重懸液小心加入到2ml 50%的percoll液面上;
6. 2500rpm/25min,室溫離心;
7. 溶液分為三層:無色上清液、中間的白色膜狀細胞層、下層的紅細胞層;
8. 吸取中間漂浮的白色膜狀細胞層;
9. 用1ml PBS重懸白色膜狀細胞層,吹打混勻;
10. 1500rpm/10min,室溫離心,沉淀用DMEM/F12完全培養基重懸;
11. 將收集的顆粒細胞,用DMEM/F12完全培養基培養。
12. 代表性結果。